■ উচ্চ পরিবর্ধন দক্ষতা: বিভিন্ন আকারের ডিএনএ টুকরা (5 kb এর চেয়ে কম) এবং উত্সগুলি দক্ষতার সাথে বাড়ানো যেতে পারে।
Sensitivity উচ্চ সংবেদনশীলতা: জিনোমিক টেমপ্লেট থেকে 10 পিজি টার্গেট টুকরো যতটা কম করা যায়।
Stress উচ্চ চাপ প্রতিরোধ: উচ্চ অপবিত্রতা বিষয়বস্তু যেমন রুক্ষ-নিষ্কাশিত টেমপ্লেট/ব্যাকটেরিয়া সংস্কৃতির টেমপ্লেটগুলির জন্য, টার্গেট টুকরা সহজেই বাড়ানো যায়। পলিমারেজ কার্যকলাপ বারবার হিমায়িত এবং গলা দ্বারা প্রভাবিত হবে না।
Applications অ্যাপ্লিকেশনের জন্য সুবিধাজনক: প্রতিক্রিয়া ব্যবস্থা সহজে এবং দ্রুত প্রস্তুত করা হয়েছিল। পরিবর্ধিত টুকরাটিতে 3 ′ এন্ড ডিএ-ওভারহ্যাং রয়েছে, যা টিএ ক্লোনিংয়ের জন্য সুবিধাজনক।
প্রকার: তাক ডিএনএ পলিমারেজ
নমুনা: শুদ্ধ/রুক্ষ-নিষ্কাশিত টেমপ্লেট/ব্যাকটেরিয়া সংস্কৃতি
টেমপ্লেট: > 10 পৃ
টুকরা আকার: <5 kb
অ্যাপ্লিকেশন: ডিএনএ টুকরাগুলির পিসিআর পরিবর্ধন, ডিএনএ লেবেলিং, প্রাইমার এক্সটেনশন, ক্রম নির্ধারণ, বড় আকারের জিন সনাক্তকরণ, আধা-পরিমাণগত পিসিআর পরীক্ষা, ট্রেস ডিএনএ সনাক্তকরণ ইত্যাদি।
সমস্ত পণ্য ODM/OEM এর জন্য কাস্টমাইজ করা যায়। বিস্তারিত জানার জন্য,অনুগ্রহ করে কাস্টমাইজড সার্ভিস (ODM/OEM) ক্লিক করুন
চিত্র ১. বিভিন্ন উৎস থেকে টেমপ্লেটগুলি টিয়েনজেন তাক মাস্টারমিক্স ২ এবং সাপ্লাইয়ার টিআর থেকে সাধারণ তাক মিক্সকে যথাক্রমে রিএজেন্টের স্ট্রেস রেজিস্ট্যান্স শনাক্ত করার জন্য পরিবর্ধিত করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে TIANGEN পণ্যগুলি অশোধিত জিনোমিক টেমপ্লেট এবং ব্যাকটেরিয়া সংস্কৃতি থেকে লক্ষ্যবস্তু টুকরোকে বাড়িয়ে তুলতে পারে এবং সরবরাহকারী টিআর -এর তুলনায় স্ট্রেস রেজিস্ট্যান্স ভালো। A: TIANGEN TIANcombi DNA Lyse & Det PCR Kit দ্বারা নিষ্কাশিত অশোধিত জিনোমিক টেমপ্লেট। পিআরপি/ডিএন: অপরিশোধিত নিষ্কাশন এবং মানুষের রক্তের নমুনা সনাক্তকরণ। চাল: অপরিশোধিত নিষ্কাশন এবং ধানের নমুনা সনাক্তকরণ। বি: কলোনি পিসিআর। পিসিআর টুকরা 700 বিপি। M: TIANGEN মার্কার III |
|
বিভিন্ন উৎস থেকে এবং বিভিন্ন দৈর্ঘ্যের টেমপ্লেটগুলির জন্য ভাল সার্বজনীনতা চিত্র 2. টিয়ানজেন ব্যবহার করে বিভিন্ন উৎস এবং দৈর্ঘ্যের টুকরো বাড়ানো হয়েছে তাক MasterMix II (A) এবং সাধারণ তাক সরবরাহকারী TK (B), সরবরাহকারী TR (C), সরবরাহকারী V (D) এবং সরবরাহকারী G (E) এর মিশ্রণ যথাক্রমে। ফলাফল দেখায় যে TIANGEN পণ্যের ব্যাপক কর্মক্ষমতা পরিবর্ধন ক্ষমতা, নির্দিষ্টতা এবং সার্বজনীনতার দিক থেকে সেরা। M: TIANGEN মার্কার III1: সয়াবিন জিনোমিক DNA টেমপ্লেট (120 bp); 2-3: চালের জিনোমিক ডিএনএ টেমপ্লেট (694 bp, 2258 bp); 4: তুলা জিনোমিক ডিএনএ টেমপ্লেট (200 bp); 5: Escherichia coli জিনোমিক ডিএনএ টেমপ্লেট (2298 bp); 6-7: মাউস জিনোম ডিএনএ টেমপ্লেট (1 কেবি, 2 কেবি); 8-10: ইঁদুর জিনোমিক ডিএনএ টেমপ্লেট (1 kb, 2 kb, 2080 bp); 11-18: মানব জিনোম ডিএনএ টেমপ্লেট (300 bp, 448 bp (GC%: 74.8%), 1100 bp, 750 bp, 1000 bp, 1090 bp (GC%: 70.4%), 2 kb, 4 kb) |
|
খুব সংবেদনশীল চিত্র rat. ইঁদুর এবং মানুষের ডিএনএ টুকরোর বিভিন্ন ঘনত্ব TIANGEN ব্যবহার করে বাড়ানো হয়েছিল তাক MasterMix II (A), সাধারণ তাক পরিবর্ধক সংবেদনশীলতা সনাক্ত করতে যথাক্রমে সরবরাহকারী V (B) এবং সরবরাহকারী TK (C) এর মিশ্রণ। ফলাফলগুলি দেখায় যে TIANGEN পণ্যটি জিনোম টেমপ্লেট থেকে 0.01 ng পর্যন্ত লক্ষ্যবস্তুকে বাড়িয়ে তুলতে পারে এবং এর সংবেদনশীলতা সরবরাহকারী V এবং TK.M: TIANGEN মার্কার III, N: NTCT- এর টেমপ্লেট ইনপুট 1-8 : 200 ng, 100 ng, 50 ng, 20 ng, 10 ng, 1 ng, 0.1 ng, 0.01 ng। |
A-1 টেমপ্লেট
■ টেমপ্লেটটিতে প্রোটিন অমেধ্য বা তাক ইনহিবিটারস ইত্যাদি রয়েছে DNA ডিএনএ টেমপ্লেট শুদ্ধ করুন, প্রোটিনের অমেধ্য দূর করুন বা পরিশোধন কিট দিয়ে টেমপ্লেট ডিএনএ বের করুন।
Template টেমপ্লেটের বিকৃতি সম্পূর্ণ হয় না den যথাযথভাবে বিকৃতি তাপমাত্রা বৃদ্ধি করে এবং বিকৃতি সময়কে দীর্ঘায়িত করে।
■ টেমপ্লেট অবনতি the টেমপ্লেটটি পুনরায় প্রস্তুত করুন।
A-2 প্রাইমার
Pri প্রাইমারের দরিদ্র গুণ the প্রাইমার পুনরায় সংশ্লেষিত করুন।
■ প্রাইমার অবনতি —— সংরক্ষণের জন্য উচ্চ ঘনত্বের প্রাইমারগুলিকে ছোট ভলিউমে ভাগ করে নিন। একাধিক হিমায়িত এবং গলা বা দীর্ঘমেয়াদী 4 ° C cryopreserved এড়িয়ে চলুন।
Pri প্রাইমারের অনুপযুক্ত নকশা (যেমন প্রাইমারের দৈর্ঘ্য পর্যাপ্ত নয়, ডাইমার প্রাইমার ইত্যাদির মধ্যে গঠিত)
A-3 Mg2+একাগ্রতা
■ এমজি2+ ঘনত্ব খুব কম - সঠিকভাবে Mg বৃদ্ধি2+ ঘনত্ব: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।
A-4 অ্যানিলিং তাপমাত্রা
An উচ্চ অ্যানিলিং তাপমাত্রা প্রাইমার এবং টেমপ্লেটের বাঁধনকে প্রভাবিত করে। - অ্যানিলিং তাপমাত্রা হ্রাস করুন এবং 2 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডের গ্রেডিয়েন্টের সাথে শর্তটি অনুকূল করুন।
A-5 এক্সটেনশনের সময়
■ সংক্ষিপ্ত এক্সটেনশন সময় extension এক্সটেনশন সময় বাড়ান।
ফেনোমেনা: নেতিবাচক নমুনাগুলি লক্ষ্য ক্রম ব্যান্ডগুলিও দেখায়।
পিসিআর এর A-1 দূষণ
Target টার্গেট সিকোয়েন্স বা পরিবর্ধন পণ্যের ক্রস দূষণ fully নেতিবাচক নমুনায় টার্গেট সিকোয়েন্স সম্বলিত নমুনাটি পাইপ না করা বা সেগুলি সেন্ট্রিফিউজ টিউব থেকে ছিটকে না দেওয়া। বিদ্যমান নিউক্লিক অ্যাসিডগুলি দূর করার জন্য রিএজেন্ট বা সরঞ্জামগুলি অটোক্লেভ করা উচিত এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ পরীক্ষার মাধ্যমে দূষণের অস্তিত্ব নির্ধারণ করা উচিত।
■ রিএজেন্ট দূষণ liএলিয়াক্ট রিএজেন্ট এবং কম তাপমাত্রায় সঞ্চয় করে।
A-2 প্রাইমr
■ এমজি2+ ঘনত্ব খুব কম - সঠিকভাবে Mg বৃদ্ধি2+ ঘনত্ব: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।
■ অনুপযুক্ত প্রাইমার নকশা, এবং লক্ষ্য ক্রম অ-লক্ষ্য ক্রম সঙ্গে সমজাতীয়তা আছে। -প্রাইমারগুলি পুনরায় ডিজাইন করুন।
ফেনোমেনা: PCR পরিবর্ধন ব্যান্ডগুলি প্রত্যাশিত আকারের সাথে অসঙ্গতিপূর্ণ, বড় বা ছোট, অথবা কখনও কখনও নির্দিষ্ট পরিবর্ধন ব্যান্ড এবং অ-নির্দিষ্ট পরিবর্ধন ব্যান্ডগুলি ঘটে।
এ -1 প্রাইমার
Oor দরিদ্র প্রাইমার নির্দিষ্টতা
-পুনরায় ডিজাইন প্রাইমার।
■ প্রাইমার ঘনত্ব খুব বেশী ro সঠিকভাবে বিকৃতি তাপমাত্রা বৃদ্ধি এবং বিকৃতি সময় দীর্ঘায়িত করে।
A-2 Mg2+ একাগ্রতা
Mg এমজি2+ ঘনত্ব খুব বেশি - Mg2+ ঘনত্বকে যথাযথভাবে হ্রাস করুন: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।
A-3 থার্মোস্টেবল পলিমারেজ
En অত্যধিক এনজাইমের পরিমাণ 0.5 0.5 ইউ এর ব্যবধানে এনজাইমের পরিমাণ যথাযথভাবে হ্রাস করুন।
A-4 অ্যানিলিং তাপমাত্রা
An অ্যানিলিং তাপমাত্রা খুব কম rop যথাযথভাবে অ্যানিলিং তাপমাত্রা বৃদ্ধি করুন বা দুই-স্তরের অ্যানিলিং পদ্ধতি অবলম্বন করুন
A-5 PCR চক্র
PC অনেক বেশি পিসিআর চক্র PC পিসিআর চক্রের সংখ্যা হ্রাস করুন।
এ -1 প্রাইমারOor দুর্বল নির্দিষ্টতা the প্রাইমারের পুনরায় ডিজাইন করুন, প্রাইমারের অবস্থান এবং দৈর্ঘ্য পরিবর্তন করুন যাতে এর নির্দিষ্টতা বৃদ্ধি পায়; অথবা নেস্টেড পিসিআর করুন।
A-2 টেমপ্লেট ডিএনএ
টেমপ্লেটটি খাঁটি নয় the টেমপ্লেটটি শুদ্ধ করুন বা পরিশোধন কিট দিয়ে ডিএনএ বের করুন।
A-3 Mg2+ একাগ্রতা
—— এমজি2+ ঘনত্ব খুব বেশি roপ্রতিমভাবে Mg কমানো2+ ঘনত্ব: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।
এ -4 ডিএনটিপি
- ডিএনটিপিগুলির ঘনত্ব খুব বেশি - ডিএনটিপির ঘনত্ব যথাযথভাবে হ্রাস করুন
A-5 অ্যানিলিং তাপমাত্রা
- খুব কম অ্যানিলিং তাপমাত্রা rop যথাযথভাবে অ্যানিলিং তাপমাত্রা বাড়ান
A-6 চক্র
Ooঅনেক চক্র theচক্র সংখ্যাটি অপটিমাইজ করুন
প্রথম ধাপ হল উপযুক্ত পলিমারেজ নির্বাচন করা। নিয়মিত Taq পলিমারেজ 3'-5 'exonuclease কার্যকলাপের অভাবের কারণে প্রুফরিড করতে পারে না, এবং অসঙ্গতি টুকরাগুলির এক্সটেনশন দক্ষতা ব্যাপকভাবে হ্রাস করবে। অতএব, নিয়মিত তাক পলিমারেজ 5 কেবি -র চেয়ে বড় টার্গেট টুকরোগুলোকে কার্যকরভাবে প্রসারিত করতে পারে না। এক্সটেনশন দক্ষতা উন্নত করতে এবং দীর্ঘ টুকরো পরিবর্ধনের চাহিদা পূরণের জন্য বিশেষ পরিবর্তন বা অন্যান্য উচ্চ বিশ্বস্ততা পলিমারেজ সহ তাক পলিমারেজ নির্বাচন করা উচিত। উপরন্তু, লম্বা টুকরোগুলির পরিবর্ধনের জন্যও প্রাইমারের নকশা, বিকৃতি সময়, এক্সটেনশনের সময়, বাফার পিএইচ ইত্যাদি সমন্বয় প্রয়োজন, সাধারণত, 18-24 bp সহ প্রাইমারগুলি ভাল ফলন দিতে পারে। টেমপ্লেট ক্ষতি রোধ করার জন্য, 94 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে বিকৃতির সময় কমিয়ে 30 সেকেন্ড বা প্রতি চক্র কম করা উচিত, এবং পরিবর্ধনের আগে তাপমাত্রা 94 ডিগ্রি সেলসিয়াসে বাড়ানোর সময় 1 মিনিটেরও কম হওয়া উচিত। তদুপরি, এক্সটেনশনের তাপমাত্রা প্রায় 68 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সেট করা এবং 1 কেবি/মিনিটের রেট অনুসারে এক্সটেনশনের সময় ডিজাইন করা দীর্ঘ টুকরোগুলির কার্যকর পরিবর্ধন নিশ্চিত করতে পারে।
উচ্চ বিশ্বস্ততার সাথে বিভিন্ন ডিএনএ পলিমারেজ ব্যবহার করে পিসিআর পরিবর্ধনের ত্রুটির হার হ্রাস করা যেতে পারে। এখন পর্যন্ত পাওয়া সমস্ত তাক ডিএনএ পলিমারেজের মধ্যে, পিএফইউ এনজাইমের সর্বনিম্ন ত্রুটির হার এবং সর্বোচ্চ বিশ্বস্ততা রয়েছে (সংযুক্ত টেবিলটি দেখুন)। এনজাইম নির্বাচন ছাড়াও, গবেষকরা প্রতিক্রিয়া অবস্থার অপ্টিমাইজেশনের মাধ্যমে পিসিআর মিউটেশনের হার আরও কমাতে পারেন, যার মধ্যে রয়েছে বাফার কম্পোজিশন, থার্মোস্টেবল পলিমারেজের ঘনত্ব এবং পিসিআর চক্র সংখ্যা অপ্টিমাইজ করা।
প্রতিষ্ঠার পর থেকে, আমাদের কারখানা নীতি অনুসরণ করে প্রথম বিশ্বমানের পণ্য বিকাশ করছে
প্রথমে মানের। আমাদের পণ্যগুলি শিল্পে চমৎকার খ্যাতি অর্জন করেছে এবং নতুন এবং পুরাতন গ্রাহকদের মধ্যে মূল্যবান বিশ্বাস।