মাউস টিস্যু সরাসরি পিসিআর কিট

নিষ্কাশন ছাড়াই প্রাণীর টিস্যু নমুনা থেকে সরাসরি টার্গেট জিনের দ্রুত বর্ধন।

মাউস টিস্যু ডাইরেক্ট পিসিআর কিট একটি অনন্য প্যাকেজিং ডিজাইন গ্রহণ করে যাতে দ্রুত জিনোমিক ডিএনএ প্রস্তুতি এবং পিসিআর পরিবর্ধনের জন্য সমস্ত রিএজেন্ট অন্তর্ভুক্ত থাকে। এটি মাউস টিস্যু (লেজ, কান এবং পায়ের আঙ্গুল) থেকে এক ধাপের জিনোম ডিএনএ পরিশোধন এবং পরবর্তী পিসিআর পরিবর্ধন এবং সনাক্তকরণের জন্য প্রযোজ্য। পুরো প্রক্রিয়ায় সমজাতকরণ, চূর্ণবিচূর্ণ, রাতারাতি হজম, জৈব দ্রাবক নিষ্কাশন, ইথানল বৃষ্টি বা কলাম বিশুদ্ধকরণ পদক্ষেপ অন্তর্ভুক্ত নয়। সহজ এবং দ্রুত অপারেশনের মাধ্যমে স্থিতিশীল ফলাফল পাওয়া যায়।

এই কিট দ্বারা প্রদত্ত 2 × Dir PCR MasterMix একটি অত্যন্ত সামঞ্জস্যপূর্ণ PCR রিএজেন্ট যা প্রোটিনের মতো অমেধ্য অপসারণের প্রয়োজন ছাড়াই দক্ষ এবং বিশেষভাবে ডিএনএকে বাড়িয়ে তুলতে পারে। এই রিএজেন্টে একটি অ্যান্টিবডি পরিবর্তিত হট-স্টার্ট থাকেতাক ডিএনএ পলিমারেজ, ডিএনটিপি, এমজিসিএল2, বাফার, সেইসাথে পিসিআর প্রতিক্রিয়ার জন্য বর্ধক, অপটিমাইজার এবং স্টেবিলাইজার। পিসিআর প্রতিক্রিয়া কেবল মোটামুটি নিষ্কাশিত টেমপ্লেট এবং নির্দিষ্ট প্রাইমার যোগ করে সঞ্চালিত হতে পারে। পুরো প্রক্রিয়াটি দ্রুত, সহজ, সংবেদনশীল, সুনির্দিষ্ট এবং স্থিতিশীল, যা বিশেষভাবে উচ্চ-থ্রুপুট স্ক্রীনিংয়ের জন্য উপযুক্ত। 2 × Dir PCR MasterMix- এ প্রিমিক্স ইলেক্ট্রোফোরেসিস ডাই থাকে, যাতে পিসিআর প্রোডাক্টগুলি প্রতিক্রিয়া হওয়ার পর সরাসরি ইলেক্ট্রোফোরেসিস সনাক্তকরণের জন্য পাঠানো যায়। পিসিআর পণ্যের '' প্রান্তে A-tailing আছে, যা TA ক্লোনিং এর জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।

বিড়াল। না প্যাকিং আকার
4992531 20 µl × 50 rxn
4992532 20 µl × 200 rxn

পণ্য বিবরণী

কর্মধারা

পরীক্ষামূলক উদাহরণ

প্রায়শই জিজ্ঞাসিত প্রশ্নাবলী

পণ্য ট্যাগ

বৈশিষ্ট্য

সহজ এবং দ্রুত: জিনোমিক ডিএনএ তরল নাইট্রোজেন গ্রাইন্ডিং এবং জৈব দ্রাবক নিষ্কাশন ছাড়াই 60 মিনিটের মধ্যে মাউসের টিস্যু থেকে দ্রুত বের করা যায়।
■ ব্যাপক প্রয়োগ: এটি মাউস লেজ, কান, পায়ের আঙ্গুল এবং অন্যান্য টিস্যু থেকে জিনোমিক ডিএনএ এক-ধাপ নিষ্কাশনের জন্য উপযুক্ত।
Specific উচ্চ সুনির্দিষ্টতা: এই পণ্যটিতে ব্যবহৃত টাক পলিমারেজ একটি অ্যান্টিবডি পরিবর্তিত হট-স্টার্ট এনজাইম, উচ্চ টেমপ্লেট এবং প্রাইমার অ্যাফিনিটি এবং পরিবর্ধন বিশিষ্টতা, যা বিশেষ করে জিনোটাইপিং এবং ট্রান্সজেনিক সনাক্তকরণের জন্য উপযুক্ত।
■ জিন ​​সনাক্তকরণ: পণ্যটি নির্ভরযোগ্য ফলাফলের সাথে কাজ করা সহজ, এবং এটি বিশেষভাবে উচ্চ-থ্রুপুট বিশ্লেষণ এবং মাউস টিস্যু সনাক্তকরণের জন্য উপযুক্ত

সমস্ত পণ্য ODM/OEM এর জন্য কাস্টমাইজ করা যায়। বিস্তারিত জানার জন্য,অনুগ্রহ করে কাস্টমাইজড সার্ভিস (ODM/OEM) ক্লিক করুন


  • আগে:
  • পরবর্তী:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×

    Workflow

    Experimental Example

    মাউস টিস্যু ডাইরেক্ট পিসিআর কিট এবং সাপ্লায়ার এ থেকে প্রাসঙ্গিক পণ্য ব্যবহার করে যথাক্রমে মাউস লেজ, মাউস কান এবং ইঁদুরের লেজ থেকে 1000 বিপি, 2000 বিপি এবং 3000 বিপি টুকরো বাড়ানো। ফলাফল দেখিয়েছে যে মাউস টিস্যু ডাইরেক্ট পিসিআর কিটের আরও ভাল নির্দিষ্টতা এবং সাফল্যের হার রয়েছে।

    প্রশ্ন: কোন পরিবর্ধন ব্যান্ড নেই

    A-1 টেমপ্লেট

    ■ টেমপ্লেটটিতে প্রোটিন অমেধ্য বা তাক ইনহিবিটারস ইত্যাদি রয়েছে DNA ডিএনএ টেমপ্লেট শুদ্ধ করুন, প্রোটিনের অমেধ্য দূর করুন বা পরিশোধন কিট দিয়ে টেমপ্লেট ডিএনএ বের করুন।

    Template টেমপ্লেটের বিকৃতি সম্পূর্ণ হয় না den যথাযথভাবে বিকৃতি তাপমাত্রা বৃদ্ধি করে এবং বিকৃতি সময়কে দীর্ঘায়িত করে।

    ■ টেমপ্লেট অবনতি the টেমপ্লেটটি পুনরায় প্রস্তুত করুন।

    A-2 প্রাইমার

    Pri প্রাইমারের দরিদ্র গুণ the প্রাইমার পুনরায় সংশ্লেষিত করুন।

    ■ প্রাইমার অবনতি —— সংরক্ষণের জন্য উচ্চ ঘনত্বের প্রাইমারগুলিকে ছোট ভলিউমে ভাগ করে নিন। একাধিক হিমায়িত এবং গলা বা দীর্ঘমেয়াদী 4 ° C cryopreserved এড়িয়ে চলুন।

    Pri প্রাইমারের অনুপযুক্ত নকশা (যেমন প্রাইমারের দৈর্ঘ্য পর্যাপ্ত নয়, ডাইমার প্রাইমার ইত্যাদির মধ্যে গঠিত)

    A-3 Mg2+একাগ্রতা

    ■ এমজি2+ ঘনত্ব খুব কম - সঠিকভাবে Mg বৃদ্ধি2+ ঘনত্ব: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।

    A-4 অ্যানিলিং তাপমাত্রা

    An উচ্চ অ্যানিলিং তাপমাত্রা প্রাইমার এবং টেমপ্লেটের বাঁধনকে প্রভাবিত করে। - অ্যানিলিং তাপমাত্রা হ্রাস করুন এবং 2 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডের গ্রেডিয়েন্টের সাথে শর্তটি অনুকূল করুন।

    A-5 এক্সটেনশনের সময়

    ■ সংক্ষিপ্ত এক্সটেনশন সময় extension এক্সটেনশন সময় বাড়ান।

    প্রশ্ন: মিথ্যা ইতিবাচক

    ফেনোমেনা: নেতিবাচক নমুনাগুলি লক্ষ্য ক্রম ব্যান্ডগুলিও দেখায়।

    পিসিআর এর A-1 দূষণ

    Target টার্গেট সিকোয়েন্স বা পরিবর্ধন পণ্যের ক্রস দূষণ fully নেতিবাচক নমুনায় টার্গেট সিকোয়েন্স সম্বলিত নমুনাটি পাইপ না করা বা সেগুলি সেন্ট্রিফিউজ টিউব থেকে ছিটকে না দেওয়া। বিদ্যমান নিউক্লিক অ্যাসিডগুলি দূর করার জন্য রিএজেন্ট বা সরঞ্জামগুলি অটোক্লেভ করা উচিত এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ পরীক্ষার মাধ্যমে দূষণের অস্তিত্ব নির্ধারণ করা উচিত।

    ■ রিএজেন্ট দূষণ liএলিয়াক্ট রিএজেন্ট এবং কম তাপমাত্রায় সঞ্চয় করে।

    A-2 প্রাইমr

    ■ এমজি2+ ঘনত্ব খুব কম - সঠিকভাবে Mg বৃদ্ধি2+ ঘনত্ব: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।

    ■ অনুপযুক্ত প্রাইমার নকশা, এবং লক্ষ্য ক্রম অ-লক্ষ্য ক্রম সঙ্গে সমজাতীয়তা আছে। -প্রাইমারগুলি পুনরায় ডিজাইন করুন।

    প্রশ্ন: অ-নির্দিষ্ট পরিবর্ধন

    ফেনোমেনা: PCR পরিবর্ধন ব্যান্ডগুলি প্রত্যাশিত আকারের সাথে অসঙ্গতিপূর্ণ, বড় বা ছোট, অথবা কখনও কখনও নির্দিষ্ট পরিবর্ধন ব্যান্ড এবং অ-নির্দিষ্ট পরিবর্ধন ব্যান্ডগুলি ঘটে।

    এ -1 প্রাইমার

    Oor দরিদ্র প্রাইমার নির্দিষ্টতা

    -পুনরায় ডিজাইন প্রাইমার।

    ■ প্রাইমার ঘনত্ব খুব বেশী ro সঠিকভাবে বিকৃতি তাপমাত্রা বৃদ্ধি এবং বিকৃতি সময় দীর্ঘায়িত করে।

    A-2 Mg2+ একাগ্রতা

    Mg এমজি2+ ঘনত্ব খুব বেশি - Mg2+ ঘনত্বকে যথাযথভাবে হ্রাস করুন: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।

    A-3 থার্মোস্টেবল পলিমারেজ

    En অত্যধিক এনজাইমের পরিমাণ 0.5 0.5 ইউ এর ব্যবধানে এনজাইমের পরিমাণ যথাযথভাবে হ্রাস করুন।

    A-4 অ্যানিলিং তাপমাত্রা

    An অ্যানিলিং তাপমাত্রা খুব কম rop যথাযথভাবে অ্যানিলিং তাপমাত্রা বৃদ্ধি করুন বা দুই-স্তরের অ্যানিলিং পদ্ধতি অবলম্বন করুন

    A-5 PCR চক্র

    PC অনেক বেশি পিসিআর চক্র PC পিসিআর চক্রের সংখ্যা হ্রাস করুন।

    প্রশ্ন: প্যাচী বা স্মিয়ার ব্যান্ড

    এ -1 প্রাইমারOor দুর্বল নির্দিষ্টতা the প্রাইমারের পুনরায় ডিজাইন করুন, প্রাইমারের অবস্থান এবং দৈর্ঘ্য পরিবর্তন করুন যাতে এর নির্দিষ্টতা বৃদ্ধি পায়; অথবা নেস্টেড পিসিআর করুন।

    A-2 টেমপ্লেট ডিএনএ

    টেমপ্লেটটি খাঁটি নয় the টেমপ্লেটটি শুদ্ধ করুন বা পরিশোধন কিট দিয়ে ডিএনএ বের করুন।

    A-3 Mg2+ একাগ্রতা

    —— এমজি2+ ঘনত্ব খুব বেশি roপ্রতিমভাবে Mg কমানো2+ ঘনত্ব: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।

    এ -4 ডিএনটিপি

    - ডিএনটিপিগুলির ঘনত্ব খুব বেশি - ডিএনটিপির ঘনত্ব যথাযথভাবে হ্রাস করুন

    A-5 অ্যানিলিং তাপমাত্রা

    - খুব কম অ্যানিলিং তাপমাত্রা rop যথাযথভাবে অ্যানিলিং তাপমাত্রা বাড়ান

    A-6 চক্র

    Ooঅনেক চক্র theচক্র সংখ্যাটি অপটিমাইজ করুন

    প্রশ্ন: 50 μl PCR বিক্রিয়া পদ্ধতিতে কত টেমপ্লেট ডিএনএ যোগ করা উচিত?
    ytry
    প্রশ্ন: লম্বা টুকরো কিভাবে বাড়ানো যায়?

    প্রথম ধাপ হল উপযুক্ত পলিমারেজ নির্বাচন করা। নিয়মিত Taq পলিমারেজ 3'-5 'exonuclease কার্যকলাপের অভাবের কারণে প্রুফরিড করতে পারে না, এবং অসঙ্গতি টুকরাগুলির এক্সটেনশন দক্ষতা ব্যাপকভাবে হ্রাস করবে। অতএব, নিয়মিত তাক পলিমারেজ 5 কেবি -র চেয়ে বড় টার্গেট টুকরোগুলোকে কার্যকরভাবে প্রসারিত করতে পারে না। এক্সটেনশন দক্ষতা উন্নত করতে এবং দীর্ঘ টুকরো পরিবর্ধনের চাহিদা পূরণের জন্য বিশেষ পরিবর্তন বা অন্যান্য উচ্চ বিশ্বস্ততা পলিমারেজ সহ তাক পলিমারেজ নির্বাচন করা উচিত। উপরন্তু, লম্বা টুকরোগুলির পরিবর্ধনের জন্যও প্রাইমারের নকশা, বিকৃতি সময়, এক্সটেনশনের সময়, বাফার পিএইচ ইত্যাদি সমন্বয় প্রয়োজন, সাধারণত, 18-24 bp সহ প্রাইমারগুলি ভাল ফলন দিতে পারে। টেমপ্লেট ক্ষতি রোধ করার জন্য, 94 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে বিকৃতির সময় কমিয়ে 30 সেকেন্ড বা প্রতি চক্র কম করা উচিত, এবং পরিবর্ধনের আগে তাপমাত্রা 94 ডিগ্রি সেলসিয়াসে বাড়ানোর সময় 1 মিনিটেরও কম হওয়া উচিত। তদুপরি, এক্সটেনশনের তাপমাত্রা প্রায় 68 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সেট করা এবং 1 কেবি/মিনিটের রেট অনুসারে এক্সটেনশনের সময় ডিজাইন করা দীর্ঘ টুকরোগুলির কার্যকর পরিবর্ধন নিশ্চিত করতে পারে।

    প্রশ্ন: কিভাবে পিসিআর এর পরিবর্ধন বিশ্বস্ততা উন্নত করবেন?

    উচ্চ বিশ্বস্ততার সাথে বিভিন্ন ডিএনএ পলিমারেজ ব্যবহার করে পিসিআর পরিবর্ধনের ত্রুটির হার হ্রাস করা যেতে পারে। এখন পর্যন্ত পাওয়া সমস্ত তাক ডিএনএ পলিমারেজের মধ্যে, পিএফইউ এনজাইমের সর্বনিম্ন ত্রুটির হার এবং সর্বোচ্চ বিশ্বস্ততা রয়েছে (সংযুক্ত টেবিলটি দেখুন)। এনজাইম নির্বাচন ছাড়াও, গবেষকরা প্রতিক্রিয়া অবস্থার অপ্টিমাইজেশনের মাধ্যমে পিসিআর মিউটেশনের হার আরও কমাতে পারেন, যার মধ্যে রয়েছে বাফার কম্পোজিশন, থার্মোস্টেবল পলিমারেজের ঘনত্ব এবং পিসিআর চক্র সংখ্যা অপ্টিমাইজ করা।

    আপনার বার্তা এখানে লিখুন এবং আমাদের কাছে পাঠান