টিগাইড কোষ/টিস্যু/উদ্ভিদ আরএনএ কিট

এ -1 সেল লিসিস বা হোমোজেনাইজেশন যথেষ্ট নয়

---- নমুনার ব্যবহার হ্রাস করুন, লিসিস বাফারের পরিমাণ বৃদ্ধি করুন, হোমোজেনাইজেশন এবং লিসিসের সময় বৃদ্ধি করুন।

A-2 নমুনার পরিমাণ খুব বড়

---- ব্যবহৃত নমুনার পরিমাণ হ্রাস করুন বা লিসিস বাফারের পরিমাণ বৃদ্ধি করুন।

A-1 অপর্যাপ্ত সেল লিসিস বা হোমোজেনাইজেশন

---- নমুনার ব্যবহার হ্রাস করুন, লিসিস বাফারের পরিমাণ বৃদ্ধি করুন, হোমোজেনাইজেশন এবং লিসিসের সময় বৃদ্ধি করুন।

A-2 নমুনার পরিমাণ খুব বড়

---- দয়া করে সর্বাধিক প্রক্রিয়াকরণ ক্ষমতা দেখুন।

A-3 RNA কলাম থেকে পুরোপুরি বিচ্ছিন্ন নয়

---- RNase- মুক্ত জল যোগ করার পর, সেন্ট্রিফুগ করার আগে কয়েক মিনিট রেখে দিন।

Eluent এ A4 ইথানল

---- ধোয়ার পরে, আবার সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং যতটা সম্ভব ওয়াশিং বাফারটি সরান।

A-5 সেল কালচার মাধ্যম পুরোপুরি মুছে ফেলা হয়নি

---- কোষ সংগ্রহ করার সময়, দয়া করে সংস্কৃতি মাধ্যমটি যতটা সম্ভব সরিয়ে ফেলতে ভুলবেন না।

A-6 RNAstore- এ সংরক্ষিত কোষগুলো কার্যকরভাবে সেন্ট্রিফিউজ হয় না

---- RNAstore ঘনত্ব গড় কোষ সংস্কৃতির মাধ্যমের চেয়ে বেশি; তাই সেন্ট্রিফিউগাল ফোর্স বাড়াতে হবে। এটি 3000x g এ সেন্ট্রিফিউজ করার পরামর্শ দেওয়া হয়।

নমুনায় A-7 কম আরএনএ সামগ্রী এবং প্রাচুর্য

---- নমুনার কারণে কম ফলন হয়েছে কিনা তা নির্ধারণ করতে একটি ইতিবাচক নমুনা ব্যবহার করুন।

A-1 উপাদানটি তাজা নয়

---- তাজা টিস্যুগুলি অবিলম্বে তরল নাইট্রোজেনে সংরক্ষণ করা উচিত বা অবিলম্বে RNAstore রিএজেন্টে নিষ্কাশন প্রভাব নিশ্চিত করতে হবে।

A-2 নমুনার পরিমাণ খুব বড়

---- নমুনার পরিমাণ কমান।

A-3 RNase দূষিতn

---- যদিও কিটে প্রদত্ত বাফারে RNase থাকে না, নিষ্কাশন প্রক্রিয়ার সময় RNase কে দূষিত করা সহজ এবং যত্ন সহকারে পরিচালনা করা উচিত।

A-4 ইলেক্ট্রোফোরেসিস দূষণ

---- ইলেক্ট্রোফোরেসিস বাফারটি প্রতিস্থাপন করুন এবং নিশ্চিত করুন যে ভোগ্য সামগ্রী এবং লোডিং বাফার RNase দূষণমুক্ত।

A-5 ইলেক্ট্রোফোরেসিসের জন্য খুব বেশি লোড হচ্ছে

---- নমুনা লোডিংয়ের পরিমাণ হ্রাস করুন, প্রতিটি কূপের লোডিং 2 μg এর বেশি হওয়া উচিত নয়।

A-1 নমুনার পরিমাণ খুব বড়

---- নমুনার পরিমাণ কমান।

A-2 কিছু নমুনায় উচ্চ ডিএনএ কন্টেন্ট রয়েছে এবং DNase দিয়ে চিকিত্সা করা যেতে পারে।

---- প্রাপ্ত RNA সমাধানের জন্য RNase- মুক্ত DNase চিকিত্সা করুন, এবং RNA চিকিত্সার পরে পরবর্তী পরীক্ষার জন্য সরাসরি ব্যবহার করা যেতে পারে, অথবা RNA পরিশোধন কিট দ্বারা আরও বিশুদ্ধ করা যেতে পারে।

কাচের জিনিসপত্রের জন্য, 150 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় 4 ঘন্টার জন্য বেকড। প্লাস্টিকের পাত্রে, 0.5 এম NaOH 10 মিনিটের জন্য নিমজ্জিত, তারপর পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে RNase- মুক্ত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন এবং তারপর RNase সম্পূর্ণরূপে অপসারণ করতে জীবাণুমুক্ত করুন। পরীক্ষায় ব্যবহৃত রিএজেন্ট বা সমাধান, বিশেষ করে জল, RNase মুক্ত হতে হবে। সমস্ত রিএজেন্ট প্রস্তুতির জন্য RNase- মুক্ত জল ব্যবহার করুন (একটি পরিষ্কার কাচের বোতলে জল যোগ করুন, 0.1% (V/V) এর চূড়ান্ত ঘনত্বের জন্য DEPC যোগ করুন, রাতারাতি ঝাঁকুনি এবং অটোক্লেভ করুন)।