রক্ত সরাসরি পিসিআর কিট

নিষ্কাশন ছাড়াই টেমপ্লেট হিসাবে রক্ত ​​ব্যবহার করে সরাসরি টার্গেট জিনের দ্রুত বর্ধন।

এই কিটটি মানব জিনোমে একক-কপি জিনকে দক্ষতার সাথে সম্প্রসারিত করতে একটি জেনেটিক্যালি ইঞ্জিনিয়ারড অ্যান্টি-ইনহিবিটার ডিএনএ পলিমারেজ গ্রহণ করে। এই কিটের ভাল অপ্টিমাইজড বাফার সিস্টেম পলিমারেজকে পিসিআর ইনহিবিটরদের প্রতিরোধকে দৃ resist়ভাবে প্রতিরোধ করতে সাহায্য করে, এইভাবে টেমপ্লেট হিসাবে রক্ত ​​এবং সংস্কৃত কোষগুলি ব্যবহার করে সরাসরি ডিএনএ বৃদ্ধি করতে পারে। এই পণ্যটি পরিচালনা করা সহজ এবং ডিএনএ পরিশোধন বা নমুনা প্রি -ট্রিটমেন্টের মতো জটিল পদক্ষেপের প্রয়োজন হয় না।
এই কিটটি 2 × MasterMix হিসাবে প্রদান করা হয়, এবং প্রতিক্রিয়া কেবল রক্তের টেমপ্লেট এবং সংশ্লিষ্ট সনাক্তকরণ প্রাইমার যোগ করে সঞ্চালিত হতে পারে। এটি স্তন্যপায়ী প্রাণীর সংস্কৃত কোষ যেমন মানুষ, ইঁদুর, শূকর, গবাদি পশু এবং অন্যান্য প্রজাতির উপর প্রয়োগ করা যেতে পারে, সেইসাথে তাজা বা 4 ℃ ক্রিওপ্রেসার্ড পুরো রক্ত, অ্যান্টিকোয়ুল্যান্ট (ইডিটিএ, সাইট্রেট, হেপারিন), তরল রক্ত ​​জমাট এবং শুকনো রক্তের দাগ। Whatman 903 এবং FTA Elute বাণিজ্যিক কার্ডে সংরক্ষিত।

বিড়াল। না প্যাকিং আকার
4992529 20 µl × 100 rxn
4992530 20 µl × 500 rxn

পণ্য বিবরণী

পরীক্ষামূলক উদাহরণ

প্রায়শই জিজ্ঞাসিত প্রশ্নাবলী

পণ্য ট্যাগ

বৈশিষ্ট্য

■ সহজ এবং দ্রুত: নমুনা প্রস্তুতি এবং ডিএনএ নিষ্কাশনের ক্লান্তিকর পদক্ষেপের প্রয়োজন ছাড়া টেমপ্লেট হিসাবে রক্ত ​​ব্যবহার করে সরাসরি পিসিআর পরিবর্ধন করা যেতে পারে।
■ উচ্চ বিশুদ্ধতা: নমুনা প্রাক-চিকিত্সা এবং ডিএনএ নিষ্কাশন পদক্ষেপগুলি এড়িয়ে যাওয়া নমুনার ক্রস-দূষণ এড়াতে সাহায্য করতে পারে।
Through উচ্চ থ্রুপুট: 96/384-ওয়েল পিসিআর প্লেটের সাথে কিটের সংমিশ্রণ করে বড় আকারের নমুনার জন্য পিসিআর সনাক্তকরণ করা যেতে পারে।
Univers দৃ univers় সার্বজনীনতা: এই কিট জটিল গৌণ কাঠামোর সাথে উচ্চ জিসি টুকরো বা টুকরো দক্ষতার সাথে বাড়িয়ে তুলতে পারে এবং পরিবর্ধনের দৈর্ঘ্য 5 কেবি পর্যন্ত হতে পারে।
Stress শক্তিশালী চাপ প্রতিরোধ: এই কিট বিভিন্ন প্রজাতি এবং রক্তের নমুনার জন্য বিভিন্ন উপায়ে সংরক্ষিত হতে পারে।

অ্যাপ্লিকেশন

এই কিটের PCR পণ্যগুলিতে 3 A-শেষে "A" থাকে, যা সরাসরি TA ভেক্টর ক্লোনিংয়ের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। এই কিটটি জিনোমিক ডিএনএ টুকরো, উচ্চ-থ্রুপুট জেনেটিক বিশ্লেষণ এবং জিনোটাইপিং (যেমন জিন সনাক্তকরণ) বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।

সমস্ত পণ্য ODM/OEM এর জন্য কাস্টমাইজ করা যায়। বিস্তারিত জানার জন্য,অনুগ্রহ করে কাস্টমাইজড সার্ভিস (ODM/OEM) ক্লিক করুন


  • আগে:
  • পরবর্তী:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example মানব EDTA anticoagulation কে একটি টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহার করে, বিভিন্ন জিসি বিষয়বস্তু সহ 4 টি জিন রক্তের সরাসরি PCR কিট দ্বারা পরিবর্ধিত করা হয়েছিল। পিসিআর প্রতিক্রিয়া সিস্টেম ছিল 20 μl, এবং 1 μl রক্ত ​​টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।
    M: TIANGEN মার্কার II; 1: ফ্র্যাগমেন্ট সাইজ 1090 bp, GC কন্টেন্ট 68.1%; 2: ফ্র্যাগমেন্ট সাইজ 1915 bp, GC কন্টেন্ট 70.4%; 3: ফ্র্যাগমেন্ট সাইজ 448 bp, GC কন্টেন্ট 74.8%; 4: ফ্র্যাগমেন্ট সাইজ 1527 bp, GC কন্টেন্ট 61.5%।
    পরীক্ষামূলক ফলাফল: ব্লাড ডাইরেক্ট পিসিআর কিট 61.5%-74.8%এর পরিসরে জিসি সামগ্রীর সাথে ডিএনএ টুকরোগুলোকে কার্যকরভাবে বাড়িয়ে তুলতে পারে, এটি উচ্চ-জিসি টুকরোকে বাড়িয়ে তুলতে সক্ষম।
    Experimental Example মানব EDTA anticoagulation কে টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহার করে, 5 টি জিন বিভিন্ন দৈর্ঘ্যের (ActB, Prp, DN1.0, Hn2.0 এবং Hn4.0) ব্লাড ডাইরেক্ট পিসিআর কিট দ্বারা পরিবর্ধিত করা হয়েছিল। পিসিআর প্রতিক্রিয়া সিস্টেম ছিল 20 μl, এবং 1 μl রক্ত ​​টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।
    M: TIANGEN মার্কার II; 1-3: 3 বিভিন্ন রক্তের নমুনা; এনটিসি: প্রাইমার ছাড়া নিয়ন্ত্রণ। পরীক্ষামূলক ফলাফল: ব্লাড ডাইরেক্ট পিসিআর কিট 4 কেবি পর্যন্ত দৈর্ঘ্যের সাথে টুকরোকে বাড়িয়ে তুলতে পারে, এটি লম্বা টুকরোকে বাড়িয়ে তুলতে সক্ষম।
    Experimental Example মানব EDTA anticoagulation কে টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহার করে, রক্তের সরাসরি PCR কিট বিভিন্ন রক্তের নমুনা পিসিআর সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। পিসিআর প্রতিক্রিয়া সিস্টেম ছিল 20 μl, এবং 1 μl রক্ত ​​টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।
    M: TIANGEN মার্কার II; 1-9: রক্তের লোডিং পরিমাণ যথাক্রমে 0.1 μl, 0.2 μl, 0.3 μl, 0.4 μl, 1 μl, 2 μl, 3 μl, 4 μl এবং 5 μl; NTC: কোন টেমপ্লেট ছাড়াই নিয়ন্ত্রণ
    পরীক্ষামূলক ফলাফল: ব্লাড ডাইরেক্ট পিসিআর কিটের রক্তের তীব্র প্রতিরোধ ক্ষমতা রয়েছে এবং এটি 0.1-5 μl লোডিং রেঞ্জের সাথে রক্তের নমুনা বাড়িয়ে তুলতে পারে।
    Experimental Example মানুষ, ইঁদুর, মুরগি এবং অন্যান্য প্রজাতির রক্তের নমুনাগুলি বিভিন্ন চিকিত্সার সাথে টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। ব্লাড ডাইরেক্ট পিসিআর কিট পিআরএনপি (হিউম্যান, 50৫০ বিপি), অ্যাক্টিন (ইঁদুর, ২০০ বিপি) এবং β-অ্যাক্টিন (মুরগি, 1.0 কেবি) বাড়ানোর জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। পিসিআর প্রতিক্রিয়া সিস্টেম ছিল 20 μl, এবং 1 μl রক্ত ​​টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। M: TIANGEN মার্কার II।
    পরীক্ষামূলক ফলাফল: রক্তের সরাসরি পিসিআর কিট বিস্তৃত নমুনায় প্রয়োগ করা যেতে পারে এবং বিভিন্ন প্রজাতির রক্তের নমুনায় সরাসরি পিসিআর সনাক্তকরণ বিভিন্ন চিকিত্সার মাধ্যমে করা যেতে পারে।
    প্রশ্ন: কোন পরিবর্ধন ব্যান্ড নেই

    A-1 টেমপ্লেট

    ■ টেমপ্লেটটিতে প্রোটিন অমেধ্য বা তাক ইনহিবিটারস ইত্যাদি রয়েছে DNA ডিএনএ টেমপ্লেট শুদ্ধ করুন, প্রোটিনের অমেধ্য দূর করুন বা পরিশোধন কিট দিয়ে টেমপ্লেট ডিএনএ বের করুন।

    Template টেমপ্লেটের বিকৃতি সম্পূর্ণ হয় না den যথাযথভাবে বিকৃতি তাপমাত্রা বৃদ্ধি করে এবং বিকৃতি সময়কে দীর্ঘায়িত করে।

    ■ টেমপ্লেট অবনতি the টেমপ্লেটটি পুনরায় প্রস্তুত করুন।

    A-2 প্রাইমার

    Pri প্রাইমারের দরিদ্র গুণ the প্রাইমার পুনরায় সংশ্লেষিত করুন।

    ■ প্রাইমার অবনতি —— সংরক্ষণের জন্য উচ্চ ঘনত্বের প্রাইমারগুলিকে ছোট ভলিউমে ভাগ করে নিন। একাধিক হিমায়িত এবং গলা বা দীর্ঘমেয়াদী 4 ° C cryopreserved এড়িয়ে চলুন।

    Pri প্রাইমারের অনুপযুক্ত নকশা (যেমন প্রাইমারের দৈর্ঘ্য পর্যাপ্ত নয়, ডাইমার প্রাইমার ইত্যাদির মধ্যে গঠিত)

    A-3 Mg2+একাগ্রতা

    ■ এমজি2+ ঘনত্ব খুব কম - সঠিকভাবে Mg বৃদ্ধি2+ ঘনত্ব: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।

    A-4 অ্যানিলিং তাপমাত্রা

    An উচ্চ অ্যানিলিং তাপমাত্রা প্রাইমার এবং টেমপ্লেটের বাঁধনকে প্রভাবিত করে। - অ্যানিলিং তাপমাত্রা হ্রাস করুন এবং 2 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডের গ্রেডিয়েন্টের সাথে শর্তটি অনুকূল করুন।

    A-5 এক্সটেনশনের সময়

    ■ সংক্ষিপ্ত এক্সটেনশন সময় extension এক্সটেনশন সময় বাড়ান।

    প্রশ্ন: মিথ্যা ইতিবাচক

    ফেনোমেনা: নেতিবাচক নমুনাগুলি লক্ষ্য ক্রম ব্যান্ডগুলিও দেখায়।

    পিসিআর এর A-1 দূষণ

    Target টার্গেট সিকোয়েন্স বা পরিবর্ধন পণ্যের ক্রস দূষণ fully নেতিবাচক নমুনায় টার্গেট সিকোয়েন্স সম্বলিত নমুনাটি পাইপ না করা বা সেগুলি সেন্ট্রিফিউজ টিউব থেকে ছিটকে না দেওয়া। বিদ্যমান নিউক্লিক অ্যাসিডগুলি দূর করার জন্য রিএজেন্ট বা সরঞ্জামগুলি অটোক্লেভ করা উচিত এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ পরীক্ষার মাধ্যমে দূষণের অস্তিত্ব নির্ধারণ করা উচিত।

    ■ রিএজেন্ট দূষণ liএলিয়াক্ট রিএজেন্ট এবং কম তাপমাত্রায় সঞ্চয় করে।

    A-2 প্রাইমr

    ■ এমজি2+ ঘনত্ব খুব কম - সঠিকভাবে Mg বৃদ্ধি2+ ঘনত্ব: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।

    ■ অনুপযুক্ত প্রাইমার নকশা, এবং লক্ষ্য ক্রম অ-লক্ষ্য ক্রম সঙ্গে সমজাতীয়তা আছে। -প্রাইমারগুলি পুনরায় ডিজাইন করুন।

    প্রশ্ন: অ-নির্দিষ্ট পরিবর্ধন

    ফেনোমেনা: PCR পরিবর্ধন ব্যান্ডগুলি প্রত্যাশিত আকারের সাথে অসঙ্গতিপূর্ণ, বড় বা ছোট, অথবা কখনও কখনও নির্দিষ্ট পরিবর্ধন ব্যান্ড এবং অ-নির্দিষ্ট পরিবর্ধন ব্যান্ডগুলি ঘটে।

    এ -1 প্রাইমার

    Oor দরিদ্র প্রাইমার নির্দিষ্টতা

    -পুনরায় ডিজাইন প্রাইমার।

    ■ প্রাইমার ঘনত্ব খুব বেশী ro সঠিকভাবে বিকৃতি তাপমাত্রা বৃদ্ধি এবং বিকৃতি সময় দীর্ঘায়িত করে।

    A-2 Mg2+ একাগ্রতা

    Mg এমজি2+ ঘনত্ব খুব বেশি - Mg2+ ঘনত্বকে যথাযথভাবে হ্রাস করুন: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।

    A-3 থার্মোস্টেবল পলিমারেজ

    En অত্যধিক এনজাইমের পরিমাণ 0.5 0.5 ইউ এর ব্যবধানে এনজাইমের পরিমাণ যথাযথভাবে হ্রাস করুন।

    A-4 অ্যানিলিং তাপমাত্রা

    An অ্যানিলিং তাপমাত্রা খুব কম rop যথাযথভাবে অ্যানিলিং তাপমাত্রা বৃদ্ধি করুন বা দুই-স্তরের অ্যানিলিং পদ্ধতি অবলম্বন করুন

    A-5 PCR চক্র

    PC অনেক বেশি পিসিআর চক্র PC পিসিআর চক্রের সংখ্যা হ্রাস করুন।

    প্রশ্ন: প্যাচী বা স্মিয়ার ব্যান্ড

    এ -1 প্রাইমারOor দুর্বল নির্দিষ্টতা the প্রাইমারের পুনরায় ডিজাইন করুন, প্রাইমারের অবস্থান এবং দৈর্ঘ্য পরিবর্তন করুন যাতে এর নির্দিষ্টতা বৃদ্ধি পায়; অথবা নেস্টেড পিসিআর করুন।

    A-2 টেমপ্লেট ডিএনএ

    টেমপ্লেটটি খাঁটি নয় the টেমপ্লেটটি শুদ্ধ করুন বা পরিশোধন কিট দিয়ে ডিএনএ বের করুন।

    A-3 Mg2+ একাগ্রতা

    —— এমজি2+ ঘনত্ব খুব বেশি roপ্রতিমভাবে Mg কমানো2+ ঘনত্ব: Mg অনুকূল করুন2+ অনুকূল Mg নির্ধারণ করতে 0.5 মিমি ব্যবধানের সাথে 1 মিমি থেকে 3 মিমি পর্যন্ত প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ দ্বারা ঘনত্ব2+ প্রতিটি টেমপ্লেট এবং প্রাইমারের জন্য ঘনত্ব।

    এ -4 ডিএনটিপি

    - ডিএনটিপিগুলির ঘনত্ব খুব বেশি - ডিএনটিপির ঘনত্ব যথাযথভাবে হ্রাস করুন

    A-5 অ্যানিলিং তাপমাত্রা

    - খুব কম অ্যানিলিং তাপমাত্রা rop যথাযথভাবে অ্যানিলিং তাপমাত্রা বাড়ান

    A-6 চক্র

    Ooঅনেক চক্র theচক্র সংখ্যাটি অপটিমাইজ করুন

    প্রশ্ন: 50 μl PCR বিক্রিয়া পদ্ধতিতে কত টেমপ্লেট ডিএনএ যোগ করা উচিত?
    ytry
    প্রশ্ন: লম্বা টুকরো কিভাবে বাড়ানো যায়?

    প্রথম ধাপ হল উপযুক্ত পলিমারেজ নির্বাচন করা। নিয়মিত Taq পলিমারেজ 3'-5 'exonuclease কার্যকলাপের অভাবের কারণে প্রুফরিড করতে পারে না, এবং অসঙ্গতি টুকরাগুলির এক্সটেনশন দক্ষতা ব্যাপকভাবে হ্রাস করবে। অতএব, নিয়মিত তাক পলিমারেজ 5 কেবি -র চেয়ে বড় টার্গেট টুকরোগুলোকে কার্যকরভাবে প্রসারিত করতে পারে না। এক্সটেনশন দক্ষতা উন্নত করতে এবং দীর্ঘ টুকরো পরিবর্ধনের চাহিদা পূরণের জন্য বিশেষ পরিবর্তন বা অন্যান্য উচ্চ বিশ্বস্ততা পলিমারেজ সহ তাক পলিমারেজ নির্বাচন করা উচিত। উপরন্তু, লম্বা টুকরোগুলির পরিবর্ধনের জন্যও প্রাইমারের নকশা, বিকৃতি সময়, এক্সটেনশনের সময়, বাফার পিএইচ ইত্যাদি সমন্বয় প্রয়োজন, সাধারণত, 18-24 bp সহ প্রাইমারগুলি ভাল ফলন দিতে পারে। টেমপ্লেট ক্ষতি রোধ করার জন্য, 94 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে বিকৃতির সময় কমিয়ে 30 সেকেন্ড বা প্রতি চক্র কম করা উচিত, এবং পরিবর্ধনের আগে তাপমাত্রা 94 ডিগ্রি সেলসিয়াসে বাড়ানোর সময় 1 মিনিটেরও কম হওয়া উচিত। তদুপরি, এক্সটেনশনের তাপমাত্রা প্রায় 68 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সেট করা এবং 1 কেবি/মিনিটের রেট অনুসারে এক্সটেনশনের সময় ডিজাইন করা দীর্ঘ টুকরোগুলির কার্যকর পরিবর্ধন নিশ্চিত করতে পারে।

    প্রশ্ন: কিভাবে পিসিআর এর পরিবর্ধন বিশ্বস্ততা উন্নত করবেন?

    উচ্চ বিশ্বস্ততার সাথে বিভিন্ন ডিএনএ পলিমারেজ ব্যবহার করে পিসিআর পরিবর্ধনের ত্রুটির হার হ্রাস করা যেতে পারে। এখন পর্যন্ত পাওয়া সমস্ত তাক ডিএনএ পলিমারেজের মধ্যে, পিএফইউ এনজাইমের সর্বনিম্ন ত্রুটির হার এবং সর্বোচ্চ বিশ্বস্ততা রয়েছে (সংযুক্ত টেবিলটি দেখুন)। এনজাইম নির্বাচন ছাড়াও, গবেষকরা প্রতিক্রিয়া অবস্থার অপ্টিমাইজেশনের মাধ্যমে পিসিআর মিউটেশনের হার আরও কমাতে পারেন, যার মধ্যে রয়েছে বাফার কম্পোজিশন, থার্মোস্টেবল পলিমারেজের ঘনত্ব এবং পিসিআর চক্র সংখ্যা অপ্টিমাইজ করা।

    আপনার বার্তা এখানে লিখুন এবং আমাদের কাছে পাঠান